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【ProteanFect】產(chǎn)品新知:西湖凝聚體實(shí)現(xiàn)人鼠雙模型高效編輯

更新時(shí)間:2025-02-19

閱讀:1445

  CRISPR/Cas9技術(shù)自誕生以來(lái),已成為生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的革命性工具,尤其在遺傳疾病治療和免疫細(xì)胞研究中展現(xiàn)出巨大潛力。然而,原代免疫細(xì)胞的基因編輯長(zhǎng)期受限于傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染技術(shù):電轉(zhuǎn)法損傷細(xì)胞活性,病毒載體存在安全風(fēng)險(xiǎn),脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率低下。

   針對(duì)這些痛點(diǎn),西湖凝聚體與西湖大學(xué)聯(lián)合研發(fā)出全·球·首·款基于內(nèi)源蛋白凝聚體的CRISPR基因編輯轉(zhuǎn)染系統(tǒng)——ProteanFect CRISPRMax,重新定義了免疫細(xì)胞基因編輯的技術(shù)范式。

圖片


技術(shù)突破:ProteanFect CRISPRMax的核心優(yōu)勢(shì)


?? 顛·覆傳統(tǒng)的遞送方式

  • 非病毒、非電轉(zhuǎn)、非脂質(zhì)體:采用生物分子凝聚體技術(shù),避免傳統(tǒng)方法的細(xì)胞損傷和安全隱患。
  • 精準(zhǔn)高效:Cas9 mRNA/sgRNA一體化遞送,人原代T細(xì)胞編輯效率超85%,小鼠原代T細(xì)胞達(dá)97%。
  • 細(xì)胞友好:溫和遞送機(jī)制保持細(xì)胞完整性和生理功能,轉(zhuǎn)染后存活率顯著提升。

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ProteanFect蛋白分子與mRNA可在體外自組裝形成蛋白納米顆粒


?? 核心科技:生物分子凝聚體遞送機(jī)制

ProteanFect CRISPRMax通過(guò)四步策略實(shí)現(xiàn)高效遞送:

  1. 智能自組裝:內(nèi)源蛋白與核酸形成穩(wěn)定納米顆粒,增強(qiáng)mRNA穩(wěn)定性。
  2. 主動(dòng)胞吞:納米顆粒通過(guò)細(xì)胞主動(dòng)內(nèi)吞進(jìn)入胞內(nèi),突破傳統(tǒng)被動(dòng)滲透效率瓶頸。
  3. 精準(zhǔn)釋放:RNP復(fù)合物在胞內(nèi)快速解離,Cas9蛋白與sgRNA靶向細(xì)胞核。
  4. 天然降解:代謝產(chǎn)物無(wú)毒性殘留,降低細(xì)胞負(fù)擔(dān)。

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ProteanFect CRISPRMax基因編輯原理示意圖


實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證:跨物種高效編輯的里程碑


人類原代T細(xì)胞編輯


效率突破:在PD-1基因編輯實(shí)驗(yàn)中,ProteanFect CRISPRMax實(shí)現(xiàn)85%以上的敲除效率,細(xì)胞活性保持90%以上。


小鼠原代T細(xì)胞案例

圖片

ProteanFect CRISPRMax 實(shí)現(xiàn)對(duì)小鼠原代T細(xì)胞的高效基因編輯

  • 陸·軍軍醫(yī)大學(xué)研究:使用PT06試劑盒共轉(zhuǎn)染Cas9 mRNA、sgRNA和EGFP-mRNA,EGFP陽(yáng)性細(xì)胞中基因敲除率達(dá)97%,存活率超對(duì)照組20%。
  • 多重優(yōu)勢(shì)
    • 共轉(zhuǎn)效率:EGFP篩選標(biāo)記與基因編輯協(xié)同完成,共表達(dá)率超90%。
    • 功能保留:轉(zhuǎn)染后細(xì)胞增殖能力和細(xì)胞因子分泌未受顯著影響。

技術(shù)對(duì)比:為何ProteanFect更勝一·籌?


指標(biāo)傳統(tǒng)電轉(zhuǎn)法病毒載體ProteanFect CRISPRMax
編輯效率30%-60%50%-80%85%-97%
細(xì)胞存活率<50%70%-90%>90%
安全性電擊損傷插入突變風(fēng)險(xiǎn)無(wú)基因組整合
操作復(fù)雜度需專用設(shè)備病毒生產(chǎn)周期長(zhǎng)即用型試劑盒


此外,ProteanFect支持103–10?個(gè)細(xì)胞級(jí)的靈活轉(zhuǎn)染規(guī)模,突破傳統(tǒng)方法對(duì)細(xì)胞數(shù)量的限制。

選擇ProteanFect:讓基因編輯更簡(jiǎn)單

試劑盒設(shè)計(jì)亮點(diǎn)

  • 即用型整合:預(yù)裝Cas9 mRNA,用戶僅需提供sgRNA即可啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)。
  • 時(shí)空精準(zhǔn)調(diào)控:mRNA遞送與RNP復(fù)合物形成同步優(yōu)化,減少脫靶效應(yīng)。
  • 跨物種兼容:已驗(yàn)證適用于人、小鼠、豬等哺乳動(dòng)物原代免疫細(xì)胞。


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